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        利什?曼原虫ELISA检测试剂盒

        上架时间:2017-1-13 14:33:03??????浏览次数:
        • 产品品牌:???美国CorteZ
        • 产品货号:???
        • 产品规格:???
        • 检测方法:???酶联免疫法
        产品介绍

        利什曼原虫ELISA 检测试剂盒说明书

        试验原理:
          美国CorteZ Lishmania-Ab试剂盒是间接法酶联免疫吸附实验(ELISA.已知LSM-Ab浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将LSM-Ab和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物AB,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中LSM-Ab的浓度?#26102;?#20363;关系。           
        自备材料
        蒸馏水。
        加样器:5ul10ul50ul100ul200500ul1000ul
        振荡器及磁力搅拌器等。

        安全性
        避免直接接触终止液和底物A、B。?#22351;?#25509;触到这些液体,请尽快用水冲洗。
        实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
        不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。

        操作注意事项
        试剂应按标签说明书储存,使?#20204;?#24674;复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
        实验中不用的板条应立即放回包?#25353;?#20013;,密封保存,以免变质。
        不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
        使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液?#20445;?#36991;免使用带金属部分的加样器。
        使?#37238;刪坏?#22609;料容器配置洗涤液。使?#20204;?#20805;分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
        洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
        底物A应挥发,避免长时间打开?#20146;印?#24213;物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
        加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
        按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
        样品收集、处理及保存方法
        血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
        血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
        细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
        保存------如果样品不立?#35789;?#29992;,应将其分成小部分-70 ℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并?#32321;?#26679;品均匀地充分解冻。

        试剂的准备
        标准品:标准品的系列稀释应在实验时准?#31119;?#19981;能储存。稀释前将标准品振荡混?#21462;?/span>

        洗涤缓冲液(50?#31890;?#30340;稀释:蒸馏水50?#26029;?#37322;。

        操作步骤
        使?#20204;埃?#23558;所有试剂充分混?#21462;?#19981;要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样?#31995;?#35823;差。
        根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使?#37238;?#23380;的尽量做复孔。
        加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。
        甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重?#21019;?#25805;作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
        每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。
        甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重?#21019;?#25805;作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
        每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。
        取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。
        在450nm波长处测定各孔的OD值。
        局限
        6?#30111;?#20934;品以?#31995;?#32467;果为非线性的,根据此标准曲线无法得到精确的结果。

        试剂盒性能
        1. 灵敏度:最小的检测浓度小于1?#30111;?#20934;品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。
        2. 特异性:不与其它细胞因子反应。
        3. 重复性:板内、板间变异系数均小于10%。

        结 果 判 断 与 分 析
        1、仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值

        2、以吸光度OD值为纵坐标(Y),相应的LSM-Ab标准品浓度为横坐标(X),做得相应的曲线,样品的LSM-Ab含量?#31579;?#25454;其OD?#28068;?#26631;准曲线换算出相应的浓度。

        3、检测值范围:0-24IU/ml

        4、敏感度: 0.1 IU/ml

        该说明书由广州健仑生物科技有限公司技术人员编译,如有出入请以英文原版为准或与我们联系。

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